Theo đó, xe máy chuyên dùng có tốc độ thiết kế nhỏ hơn 70km/giờ (trừ người, phương tiện, thiết bị phục vụ việc quản lý, bảo trì đường cao tốc); máy kéo, xe mô-tô hai bánh, xe mô-tô ba bánh, xe gắn máy (kể cả xe máy điện) và các loại xe tương tự; máy thi công tự hành, xe bánh xích (trừ các phương tiện làm nhiệm vụ duy tu bảo dưỡng, kiểm tra, sửa chữa đường cao tốc); người đi bộ không được tham gia giao thông trên đường cao tốc đoạn Mai Dịch-Nam Thăng Long.
Các phương tiện được tham gia giao thông trên đường cao tốc: ngoại trừ các phương tiện, đối tượng được nêu trên, các phương tiện cơ giới đường bộ có kiểm định an toàn kỹ thuật và bảo vệ môi trường và bảo đảm các quy định của pháp luật có liên quan được phép tham gia giao thông trên đường cao tốc.
Sở Giao thông vận tải Hà Nội yêu cầu, phương tiện không được quay đầu xe trên đường cao tốc, không cho phương tiện giao thông chạy vào làn dừng khẩn cấp, làn này chỉ phục vụ cho các phương tiện phải dừng khẩn cấp. Trên tuyến đường cao tốc bố trí một điểm quay đầu xe phục vụ công tác cứu nạn, cứu hỏa, điều tiết giao thông (tại lý trình Km3+42,2-Km3+167,2).
Các phương tiện từ đường Phạm Hùng và từ trục Xuân Thủy-Hồ Tùng Mậu có thể kết nối vào cao tốc tại điểm kết nối sau nút giao Mai Dịch. Các phương tiện đi trên đường cao tốc từ cầu Thăng Long về nút giao Mai Dịch có thể ra khỏi cao tốc tại vị trí trước nút Mai Dịch để kết nối với trục đường Xuân Thủy-Hồ Tùng Mậu hoặc vào cầu vượt dành cho đường đô thị (cầu vượt Mai Dịch) để vượt qua.
Các phương tiện từ đường Phạm Văn Đồng, đường Hoàng Quốc Việt, Trần Quốc Hoàn có thể kết nối vào cao tốc tại nhánh lên của nút giao Hoàng Quốc Việt (nhánh HQV-A) đi cầu Thăng Long, Nội Bài.
Các phương tiện đi trên đường cao tốc từ cầu Thăng Long về nút giao Mai Dịch có thể ra khỏi cao tốc tại nhánh xuống của nút giao Hoàng Quốc Việt để kết nối với đường Phạm Văn Đồng đi Hoàng Quốc Việt hoặc trục đường Xuân Thủy-Hồ Tùng Mậu.
Phương tiện từ đường Phạm Văn Đồng, Đỗ Nhuận, có thể kết nối vào tốc tại nhanh lên của nút giao Tây Thăng Long (nhánh CN-A) đi Mai Dịch. Các phương tiện đi trên đường cao tốc từ nút giao Mai Dịch hướng về cầu Thăng Long có thể ra khỏi cao tốc tại nhánh xuống của nút giao Tây Thăng Long (nhánh CN-IB) để kết nối với đường Phạm Văn Đồng đi Đỗ Nhuận, công viên Hòa Bình.
Đối với tốc độ các phương tiện tham gia giao thông trên đường Vành đai 3 trên cao đoạn Mai Dịch-Nam Thăng Long, tốc độ tối đa là 100km/giờ, tốc độ tối thiểu là 60km/giờ.